Поиск в словарях
Искать во всех

Словарь микробиологии - реакция связывания комплемента

 

Реакция связывания комплемента

(РСК) серол. реакция, используемая для количественного определения комплементсвязывающих Ат и Аг. Принцип РСК состоит в том, что специфический иммунный комплекс полностью или частично адсорбирует добавленный в систему С. В качестве количественного индикатора связывания С берут гемолитическую систему, гемолиз к-рой указывает на отсутствие иммунного комплекса в диагностической системе (отрицательная РСК), задержка гемолиза на присутствие иммунного комплекса (положительная РСК).

В РСК применяют: 1) прогретую при 57 °С 30 мин иссл. с-ку, она должна быть свежей, без взвешенных частиц, цитотоксинов, С. В опыт обычно берут несколько кратных 2 разведении с-ки в зависимости от диагностического титра РСК при предполагаемом заболевании; 2) диагностикум продажный или специально приготовленный для РСК; 3) С в рабочей дозе, к-рая при титровании с Аг равна титру С, а при титровании без Аг выше титра С на 20 25%; 4) эритроциты барана отмывают несколько раз физраствором и готовят 3% взвесь; 5) гемолитическую с-ку разводят в 3 раза меньше титра, указанного на этикетке.

Все 5 компонентов берут в одинаковом объеме (0,5 мл или 0,25 мл). В опытную (диагностическую) систему вводят иссл. с-ку, диагностикум, С. Готовят контроли: с-ки с-ку, С и физраствор (вместо Аг); диагностикума -диагностикум, С и физраствор (вместо с-ки); СС и двойной объем физраствора; заведомо положительный -стандартная иммунная с-ка, Аг, С; заведомо отрицательный нормальная с-ка, Аг, С.

Пробирки встряхивают и ставят в термостат при 37 °С на 45 мин. Одновременно заготавливают гемолитическую систему, смешивая равные объемы 3% взвеси эритроцитов барана и гемолитической с-ки, и инкубируют ее в термостате такое же время. После сенсибилизации во все опытные и контрольные пробирки добавляют двойной объем гемолитической системы (1 мл или 0,5 мл).

Все пробирки выдерживают в термостате при 37°С до появления полного гемолиза в контрольных пробирках (около 30 40 мин). При количественном способе постановки реакции находят разведение, в к-ром имеется задержка гемолиза не менее чем на 2+ (титр Ат иссл. с-ки) и сравнивают его с диагностическим титром распознаваемой болезни. Полуколичественный способ с одним разведением с-ки (обычно 1:5) дает возможность определить степень задержки гемолиза на 4+, 3+, 2+ и, исходя из этого, оценить интенсивность реакции.

Более точные результаты представляет нахождение титра с-ки не по 100%, а по 50% гемолизу (см. Комплемента определение). Предложен вариант количественной постановки РСК, в к-ром берут одно разведение с-ки, но несколько доз С (1; 1,5; 2; 2,5; 3; 4). Все остальные компоненты используют в таких же количествах. При оценке имеют в виду то обстоятельство, что чем больше доз С связывает иссл. с-ка, тем больше в ней Ат.(Источник: «Словарь терминов микробиологии») .
Рейтинг статьи:
Комментарии:

Вопрос-ответ:

Что такое реакция связывания комплемента
Значение слова реакция связывания комплемента
Что означает реакция связывания комплемента
Толкование слова реакция связывания комплемента
Определение термина реакция связывания комплемента
reakciya svyazyvaniya komplementa это
Ссылка для сайта или блога:
Ссылка для форума (bb-код):

Самые популярные термины